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來源:(新華社 王立群/圖) 發(fā)布:2020-12-20
全球水稻種植面積已經(jīng)達(dá)23.97億畝,有113個國家種植,是全球一半以上人口賴以生存的基本食糧,也是大部分中國人的主食。
香稻作為水稻家族中的特殊成員,栽培歷史相當(dāng)悠久,世界上各水稻生產(chǎn)國或地區(qū)幾乎都有特別的香稻品種。國際市場上著名的香米品種主要有泰國香米(Khao Dawk Mali 105)巴基斯坦香米(Basmati)、印度香米(Jccrakasala)、印尼香米(Scratns Malam)、菲律賓香米(Milagrosa)和美國香米(Della)等。
中國同樣有香米,而且有很豐富的香稻資源,如湖南的江永香米、山東的曲阜香稻、陜西的洋縣香米、廣西的靖西香糯、廣東的增城絲苗香米、浙江的龍泉香稻和福建的過山香米等。無論是世界上的香米還是中國的香米,都表現(xiàn)出一種特點(diǎn),只是在一個特定的地區(qū)產(chǎn)出,生態(tài)適應(yīng)范圍窄,地域性很強(qiáng),因而難以滿足更多人的消費(fèi)需求。
巴基斯坦的香稻Basmati370引種到菲律賓種植時,香味會明顯減少。中國湖南的江永香米產(chǎn)地只局限于江永縣源口鄉(xiāng)特定的幾十畝稻田,如果移栽到其他地方,不但產(chǎn)量低,香味也消失。此外,山東曲阜香稻僅適合在城關(guān)、息陬一帶種植,移植到其他地方,也會失去香味。
香稻之所以發(fā)出誘人香味,有兩大原因。一是香稻的遺傳基因,二是香稻生長的生境,主要指栽培過程中的土壤、氣候等生態(tài)條件,因此香稻是香味基因和環(huán)境相互作用的結(jié)果。為了提高香米的產(chǎn)量,需要在水稻的遺傳基因和生境方面創(chuàng)造條件?,F(xiàn)在,以CRISPR/Cas9為主的基因編輯技術(shù)不僅可以增強(qiáng)香味基因,還可以對普通水稻增添香味基因,從而可能生產(chǎn)出更多的香稻,讓人們吃上香噴噴的大米。
研究早就發(fā)現(xiàn),2-乙酰-1-吡咯啉(2-acetyl-1-pyrroline,2-AP)是香稻香味特征化合物和主要香氣的貢獻(xiàn)物,它的含量不同決定了稻米的香味有所不同,因為2-AP的含量在不同香米品種間存在差異,當(dāng)然更是多于普通稻米中的含量。進(jìn)一步的研究還證實了巴斯馬蒂香型、茉莉香型等不同香味類型香稻中的香氣主要成分都是2-AP。因此,針對2-AP的基因改造就成為研究的重點(diǎn),這就需要CRISPR/Cas9來幫助。
同時,研究也發(fā)現(xiàn),2-AP受到其他作物基因抑制,其中主要的就是BADH2,它是編碼甜菜堿醛脫氫酶的基因,但是會抑制水稻的香味基因2-AP。研究人員發(fā)現(xiàn),完整的全長BADH2蛋白(503個殘基)僅出現(xiàn)在無香味的轉(zhuǎn)基因品系和水稻品種中。而且,在香米品種中轉(zhuǎn)入BADH2基因,香米稻中的2-AP含量顯著降低,香氣損失,證明BADH2是控制米香的主效基因。
由此證明,BADH2編碼的全長BADH2蛋白可以抑制2-AP的生物合成,從而使水稻變得沒有香味。后來的研究還發(fā)現(xiàn),由于BADH2基因中的8bp堿基缺失而使其原有功能喪失,導(dǎo)致2?AP在水稻中大量積累從而產(chǎn)生香味,這或許就是香稻和普通水稻在遺傳基因和基因表達(dá)上的重要原因。
過去,香米品種的培育是利用雜交方式將香米基因轉(zhuǎn)入普通稻米中,盡管可以通過分子標(biāo)記進(jìn)行輔助選擇,但這個過程比較復(fù)雜,而且周期較長。后來,比較有效的方式是利用基因編輯切割或敲除BADH2基因,使其不再抑制香米的香味基因2-AP,讓香米產(chǎn)生更多的香味,而且把香味基因2-AP轉(zhuǎn)入到普通水稻中,也可以讓普通稻米產(chǎn)生香味,成為香米。
過去,研究人員已經(jīng)在利用另一種基因編輯工具轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶(TALEN)對水稻敲除BADH2,以使水稻獲得香味。但是,這種基因編輯工具需要依賴于上下游序列,脫靶率高,且具有細(xì)胞毒性,因此改造香米和創(chuàng)造香米的效果并不是很好。
現(xiàn)在,研究人員采用更高效和準(zhǔn)確的CRISPR/Cas9能在水稻活細(xì)胞中更有效更便捷地“編輯”香米基因,以及其他基因。利用CRISPR/Cas9對蠟質(zhì)基因(Wx)、BADH2兩個基因進(jìn)行切割或?qū)е缕渫蛔儯ㄇ贸鼴ADH2中的8bp堿基),可以解除其對香味基因2-AP的抑制,從而增加2-AP的積累和含量,同時產(chǎn)生較低直鏈淀粉含量(13%-18%)的營養(yǎng)性較高的大米。
直鏈淀粉(amylose, AM)和支鏈淀粉(amylpectin, AP)是稻米淀粉的兩種類型,二者的組成比例決定了稻米的食用品質(zhì)和加工品質(zhì)?,F(xiàn)在,也有研究人員采用CRISPR/Cas9基因剪刀敲除水稻蠟質(zhì)基因Wx,成功將突變體水稻的直鏈含量由14.6%降至2.6%,獲得糯性稻米,成為更有營養(yǎng)的稻米。
盡管現(xiàn)在這樣的研究還只是處于育種和產(chǎn)生優(yōu)質(zhì)新種的階段,但是,可以解決香稻和高質(zhì)量水稻的基因問題。而剩下的另一個大問題當(dāng)然是要研究香稻生產(chǎn)的生境。國外的研究表明,香稻品種之一的Khao Dawk Mali 105中2-AP含量受到干旱氣候的影響。國內(nèi)的研究表明,香稻產(chǎn)地土壤中的有機(jī)質(zhì)、全氮、堿解氮、全磷、速效磷含量以及鐵、錳、銅、鋅等微量元素含量均高于非產(chǎn)地。對中國的中香1號和田東香稻種研究發(fā)現(xiàn),在川陜盆地單季稻兩熟亞區(qū)種植后,其籽粒糙米中的2-AP含量最高。原因可能是,各個稻區(qū)間海拔高度存在差異。還有研究認(rèn)為鋅是水稻香味產(chǎn)生的必需元素之一。
因此,只有從基因和生境兩方面著手,才有可能創(chuàng)造出更多更好的香米,以滿足人們的需求,以CRISPR/Cas9為代表的基因剪刀的出現(xiàn)為研究人員研發(fā)出更多的香米提供了條件。當(dāng)然,基因剪刀還可以有其他的作用。
稻米中的營養(yǎng)蛋白可分為谷蛋白、醇溶蛋白、球蛋白和白蛋白等,極大多數(shù)稻米蛋白的合成受到多基因及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的控制,現(xiàn)在對稻米營養(yǎng)品質(zhì)尤其是蛋白營養(yǎng)品質(zhì)合成等方面的遺傳機(jī)制及合成調(diào)控機(jī)理研究還很少,如果進(jìn)一步的研究能確定哪些基因是有利于增加稻米的蛋白質(zhì)含量,哪一些基因是抑制稻米的蛋白質(zhì)產(chǎn)量,就能轉(zhuǎn)入高蛋白產(chǎn)量的基因和敲除抑制蛋白產(chǎn)量的基因,讓人們不僅能吃到香噴噴的大米,還能吃到蛋白質(zhì)含量高的高營養(yǎng)大米。
CRISPR/Cas9還可以培育高產(chǎn)水稻,讓水稻增產(chǎn)。粒重是水稻產(chǎn)量構(gòu)成的重要性狀,與有效穗數(shù)和每穗粒數(shù)共同構(gòu)成水稻產(chǎn)量三要素,這些要素是多基因控制的,體現(xiàn)為基因的數(shù)量性狀位點(diǎn)?,F(xiàn)在,研究人員用CRISPR/Cas9敲除3個水稻品種中粒長基因GS3、GS2和每穗粒數(shù)基因Gn1a,發(fā)現(xiàn)三基因突變有疊加增產(chǎn)效應(yīng)。還有研究人員采用CRISPR/Cas9敲除水稻千粒重基因、粒重基因GW2、GW5和千粒重多基因TGW6后,得到gw2gw5tgw6 和gw2gw5 純合突變體,發(fā)現(xiàn)突變體粒長、粒寬和粒重都顯著增加,從而有效增加了產(chǎn)量。
基因編輯不只是對創(chuàng)造高產(chǎn)和優(yōu)質(zhì)水稻大有作用,而且對于創(chuàng)造其他優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)農(nóng)產(chǎn)品,如玉米、小麥等,也有巨大的技術(shù)推動作用。
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